Tipagem do Treponema pallidum por MLST em pacientes do sexo masculino com úlceras genitais em uma clínica pública de DST no Sul do Brasil: um novo alelo e resistência quase completa aos macrolídeos

Resumo

Objetivo: Considerando a ausência de dados sobre genotipagem de T. pallidum no Brasil, objetivamos estudar suas cepas e sua resistência aos macrolídeos em úlceras genitais sugestivas de sífilis.
Métodos: Foram convidados a participar homens com úlceras genitais sugestivas de sífilis. As amostras foram coletadas com swab de algodão seco e imersas em solução de NaCl 0,9%. A detecção foi feita por amplificação por PCR de 260 pb do gene tpp47. O produto de PCR foi analisado por eletroforese em gel de agarose a 2% contendo brometo de etídio a 0,05%. Amostras de PCR positivas foram analisadas por MLST (sequenciamento dos loci cromossômicos TP0136, TP0548 e TP0705). As mutações A2058G e A2059G no gene 23S rRNA foram avaliadas por nested PCR. O sequenciamento de DNA foi analisado utilizando o software Bioedit (Tom Hall, EUA). A genotipagem foi realizada utilizando a plataforma online PubMLST (esquema Grillová).
Resultados: Todos os sujeitos eram residentes de Porto Alegre e tinham idade entre 19 e 66 anos. Das 43 amostras, 32 foram positivas para PCR para T. pallidum. Trinta cepas estavam disponíveis para genotipagem e pertenciam ao Complexo Clonal SS14-like (73,3%) ou Nichols-like (20%). Três perfis completos de MLST foram identificados (1.3.1; 9.7.3 e 28.7.3), e um novo alelo foi identificado em uma amostra (aprovado pelos curadores do pubMLST como TP0705-22). Apenas uma amostra não apresentava a mutação 2058 no gene 23S rRNA.
Conclusão: Nosso estudo identificou diversidade genética no DNA de T. pallidum usando MLST com variantes alélicas para TP0136, TP0548 e TP0705, incluindo um novo alelo. Uma única amostra foi caracterizada como genotípicamente suscetível a macrolídeos. Todas as demais amostras (mais de 95%) apresentaram a mutação A2058G no gene 23S rRNA, que causa resistência aos macrolídeos. Melhorar a compreensão da epidemiologia local do T. pallidum com amostragens representativas que permitam análise de cofatores é crucial para a prevenção e o cuidado.