Tipificación de Treponema pallidum mediante MLST en pacientes masculinos con úlceras genitales en una clínica pública de ETS en el sur de Brasil: un nuevo alelo y resistencia casi completa a los macrólidos.

Resumen

Objetivo: Considerando la falta de datos sobre el genotipado de T. pallidum en Brasil, nos propusimos estudiar sus cepas y su resistencia a macrólidos en úlceras genitales sugestivas de sífilis. Métodos: Se invitó a participar a hombres con úlceras genitales sugestivas de sífilis. Las muestras se recogieron con un hisopo de algodón seco y se sumergieron en una solución de NaCl al 0,9%. La detección se realizó mediante amplificación por PCR de 260 pb del gen tpp47. El producto de la PCR se analizó mediante electroforesis en un gel de agarosa al 2% que contenía bromuro de etidio al 0,05%. Las muestras de PCR positivas se analizaron mediante MLST (secuenciación de los loci cromosómicos TP0136, TP0548 y TP0705). Las mutaciones A2058G y A2059G en el gen 23S rRNA se evaluaron mediante PCR anidada. La secuenciación de ADN se analizó utilizando el software Bioedit (Tom Hall, EE. UU.). El genotipado se realizó utilizando la plataforma en línea PubMLST (esquema Grillová). Resultados: Todos los sujetos eran residentes de Porto Alegre y tenían edades comprendidas entre 19 y 66 años. De las 43 muestras, 32 resultaron positivas a la PCR para T. pallidum. Treinta cepas estaban disponibles para el genotipado y pertenecían al Complejo Clonal tipo SS14 (73,3%) o tipo Nichols (20%). Se identificaron tres perfiles MLST completos (1.3.1; 9.7.3 y 28.7.3) y se identificó un nuevo alelo en una muestra (aprobado por los curadores de pubMLST como TP0705-22). Sólo una muestra no presentó la mutación 2058 en el gen 23S rRNA. Conclusión: Nuestro estudio identificó diversidad genética en el ADN de T. pallidum utilizando MLST con variantes alélicas para TP0136, TP0548 y TP0705, incluido un nuevo alelo. Una sola muestra se caracterizó como genotípicamente susceptible a macrólidos. El resto de muestras (más del 95%) presentaron la mutación A2058G en el gen 23S rRNA, que provoca resistencia a los macrólidos. Mejorar la comprensión de la epidemiología local de T. pallidum con muestras representativas que permitan el análisis de cofactores es crucial para la prevención y la atención.