Whole-slide imaging para avaliação da imunocitoquímica de dupla marcação no linfoma canino

Resumo

O linfoma é uma das neoplasias hematopoéticas mais comuns em cães, e a citopatologia é amplamente utilizada para o seu diagnóstico. Esta avaliação é comumente realizada por meio de microscopia óptica (MO). Por outro lado, a patologia digital (PD) vem sendo cada vez mais adotada na medicina veterinária para o diagnóstico citopatológico. No entanto, não há estudos que avaliem o uso da PD na análise de amostras submetidas à imunocitoquímica (ICC). Neste sentido, este estudo possui dois objetivos: 1) determinar a concordância entre slides digitalizados e MO na interpretação da ICC de dupla marcação no linfoma canino, em um único observador (intraobservacional); e 2) determinar a interobservância entre dois avaliadores em amostras digitais. Para realizar os objetivos, vinte e oito lâminas previamente coradas foram digitalizadas por meio de whole-slide imaging (WSI) scan, na metodologia Standard mode, com magnificação de 400x, antes e após a dupla marcação. Os marcadores CD20 e CD3ε foram utilizados para imunofenotipagem. Além disso, as lâminas convencionais e as digitalizadas foram avaliadas por um único observador. Igualmente, um segundo observador também avaliou todas as amostras digitais. O coeficiente de Kappa foi utilizado para determinar a concordância intraobservador (MO versus WSI) e interobservadores (WSI versus WSI). Os resultados mostram que o imunofenótipo foi estabelecido por ambos os avaliadores em 24 amostras digitalizadas. A concordância intraobservador foi κ = 0.86 (IC de 95%, 0.68–1.00) e a interobservador foi κ = 0.87 (IC de 95%, 0.71–1.00), ambas quase perfeitas. Amostras escaneadas digitalmente via WSI são adequadas para a determinação do imunofenótipo por dupla marcação em linfomas caninos.